(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111602287.1 (22)申请日 2021.12.24 (71)申请人 合肥天港免疫药物有限公司 地址 230001 安徽省合肥市经济技 术开发 区芙蓉路268号合肥创新创业园1#C二 楼2001 (72)发明人 田志刚　曹国帅　肖卫华　孙汭　 孙昊昱　 (74)专利代理 机构 北京清亦华知识产权代理事 务所(普通 合伙) 11201 专利代理师 黄德海 (51)Int.Cl. C07K 19/00(2006.01) C12N 15/62(2006.01) G01N 33/574(2006.01)G01N 33/68(2006.01) A61K 39/395(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A23L 33/10(2016.01) A23L 33/13(2016.01) (54)发明名称 重组抗体及其应用 (57)摘要 本发明提出了一种重组抗体及其应用， 该重 组抗体为双 链抗体， 包括： 第一条肽 链， 包括CD16 单链抗体、 IL ‑21分子和第一Fc区， 所述CD16 单链 抗体包括重链可变区、 轻链可变区； 以及第二条 肽链， 包括TIGIT胞外区和第二Fc区； 其中， 所述 CD16单链抗体的C端与所述IL ‑21分子的N端相 连， 所述IL ‑21分子的C端与所述第一Fc区的N端 相连， 所述TIGIT胞外区的C端与所述Fc区的N端 相连。 本发明所制备的重组抗体能同时靶向 CD16、 CD155以及IL ‑21R， 从而介导NK细胞对肿瘤 细胞的杀伤， 具有较强的肿瘤抑制能力。 权利要求书2页 说明书17页 附图3页 CN 115417930 A 2022.12.02 CN 115417930 A 1.一种重组抗体， 其特 征在于， 所述重组抗体为双链抗体， 包括： 第一条肽链， 包括CD16单链抗体、 IL ‑21分子和第一Fc区， 所述CD16单链抗体包括重链 可变区、 轻链可变区； 以及 第二条肽链， 包括TIGIT胞外区和第二Fc区； 其中， 所述CD16单链抗体的C端与所述IL ‑21分子的N端相连， 所述IL ‑21分子的C端与所 述第一Fc区的N端相连， 所述TIGIT胞外区的C端与所述Fc区的N端相连。 2.根据权利要求1所述的重组抗体， 其特征在于， 进一步包括连接肽1， 所述连接肽1的N 端与所述重链可变区的C端相连， 所述连接肽1的C端与所述轻链可变区的N端相连； 任选地， 所述连接肽1包括SEQ  ID NO： 15所示的氨基酸序列。 3.根据权利要求1或2所述的重组抗体， 其特征在于， 进一步包括连接肽2， 所述连接肽2 的N端与所述轻链可变区的C端相连， 所述连接肽2的C端与所述 IL‑21分子的N端相连； 任选地， 所述连接肽2包括SEQ  ID NO： 17所示的氨基酸序列。 4.根据权利要求1 ‑3任一项所述的重组抗体， 其特征在于， 进一步包括连接肽3， 所述连 接肽3的N端与所述 IL‑21分子的C端相连， 所述连接肽3的C端与所述第一Fc区的N端相连； 任选地， 所述连接肽3包括SEQ  ID NO： 18所示的氨基酸序列。 5.根据权利要求1 ‑4任一项所述的重组抗体， 其特征在于， 进一步包括连接肽4， 所述连 接肽4的N端与所述TIGIT胞外区的C端相连， 所述连接肽4的C端与所述第二Fc区的N端相连； 任选地， 所述连接肽4包括SEQ  ID NO： 21所示的氨基酸序列。 6.根据权利要求1所述的重组抗体， 其特征在于， 所述第一Fc区和第二Fc区通过knob   into hole结构进行 连接。 7.根据权利要求6所述的重组抗体， 其特征在于， 所述第 一Fc区和第 二Fc区的至少一部 分来自于鼠源抗体、 人源抗体、 灵 长目源抗体或其 突变体的至少之一， 任选地， 所述第一Fc区和第二Fc区的至少一部分来自鼠源抗体、 人源抗体、 灵长目源 IgG抗体或其 突变体； 任选地， 所述第一Fc区和第二Fc区的至少一部分来自人源IgG1或其 突变体。 8.根据权利要求6所述的重组抗体， 其特征在于， 所述第一Fc区与野生型IgG1  Fc区相 比具有缺少CH1区、 T366W突变中的至少之一， 所述第二Fc区与野生型IgG1  Fc区相比具有缺 少CH1区、 T366S、 L368A、 Y407V突变中的至少之一。 9.根据权利要求6 ‑8任一项所述的重组抗体， 其特征在于， 所述第一Fc区具有如SEQ  ID  NO:19所示的氨基酸序列， 所述第二Fc区具有如SEQ  ID NO:22所示的氨基酸序列。 10.根据权利要求1 ‑9任一项所述的重组抗体， 其特征在于， 所述重组抗体的具有SEQ   ID NO： 3、 4所示的氨基酸序列。 11.一种核酸， 其特 征在于， 所述核酸编码权利要求1～10任一项所述的重组抗体。 12.根据权利要求11所述的核酸， 其特征在于， 所述核酸具有SEQ  ID NO： 1、 2所示的核 苷酸序列。 13.一种表达载体， 其特 征在于， 携带权利要求1 1或12所述的核酸。 14.一种制备权利要求1～10任一项所述的重组抗体的方法， 其特 征在于， 包括： 将权利要求13所述的表达载体引入到细胞中； 将所述细胞在适于蛋白表达和分泌的条件下进行培 养， 以便获得 所述重组抗体；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115417930 A 2任选地， 所述细胞为真核细胞。 15.一种重组细胞， 其特征在于， 所述重组细胞携带权利要求1 ‑10任一项所述的重组抗 体、 权利要求1 1或12所述的核酸， 或权利要求13所述的表达载体。 16.一种组合物， 其特 征在于， 包括： 权利要求1～10任一项所述的重组抗体、 权利 要求11或12所述的核酸、 权利要求13所述 的表达载体或权利要求15所述的重组细胞。 17.权利要求1～10任一项所述的重组抗体、 权利要求11或12所述的核酸、 权利要求13 所述的表达载体、 权利要求 15所述的重组细胞或权利要求 16所述的组合物在制备药物中的 用途， 所述药物用于治疗或者预防癌症。 18.根据权利要求17所述的用途， 其特征在于， 所述癌症包括下列中的至少之一： 肺癌、 肝癌、 卵巢癌、 宫颈癌、 皮肤癌、 膀胱癌、 结肠癌、 乳 腺癌、 神经胶质瘤、 肾癌、 胃癌、 食道癌、 口 腔鳞状细胞癌和头 颈癌。 19.一种药物， 其特征在于， 包括： 权利要求1～10任一项所述的重组抗体、 权利要求11 或12所述的核酸、 权利要求13所述的表达载体、 权利要求15所述的重组细胞或权利要求16 所述的组合物， 所述药物用于治疗癌症。 20.根据权利要求19所述的药物， 其特征在于， 所述癌症包括下列中的至少之一： 肺癌、 肝癌、 卵巢癌、 宫颈癌、 皮肤癌、 膀胱癌、 结肠癌、 乳 腺癌、 神经胶质瘤、 肾癌、 胃癌、 食道癌、 口 腔鳞状细胞癌和头 颈癌。 21.权利要求1～10任一项所述的重组抗体在制备试剂 盒中的用途， 所述试剂 盒用于检 测CD16和/或CD15 5和/或IL‑21R。 22.一种试剂盒， 其特 征在于， 所述试剂盒包 含权利要求1～10任一项所述的重组抗体。 23.根据权利要求22所述的试剂盒， 其特征在于， 所述试剂盒用于检测CD16和/或CD155 和/或IL‑21R.。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115417930 A 3