(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111597010.4 (22)申请日 2021.12.24 (71)申请人 复旦大学附属肿瘤医院 地址 200032 上海市徐汇区东 安路270号 (72)发明人 修秉虬　吴炅　张琪　迟亚云　 薛静彦　张礼翼　陈铭　季玮儒　 (74)专利代理 机构 上海容慧专利代理事务所 (普通合伙) 31287 代理人 于晓菁 (51)Int.Cl. C12N 15/113(2010.01) A61K 31/713(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/04(2006.01) (54)发明名称 靶向LINC00624的反义寡核苷酸及其在乳腺 癌治疗中的应用 (57)摘要 本发明属于乳腺癌治疗技术领域， 具体公开 了靶向LINC00624的反义寡核苷酸及其在乳腺癌 治疗中的应用。 本发明发现了乳腺癌耐药的分子 标志物LINC00624， 并获得能高效靶向降解细胞 中LINC00624的5种反义寡核苷酸(ASO1 ‑5)， 对其 进行了胆固醇修饰后， 通过对小鼠静脉注射验 证， 本发明的5种反义寡核苷酸(ASO1 ‑5)单个或 者混合使用， 均能够对乳腺癌移植瘤的抑制作 用， 从而实现单用或联合用药， 增强抗癌效果的 药物。 权利要求书1页 说明书9页 附图2页 CN 114196675 A 2022.03.18 CN 114196675 A 1.反义寡核苷酸， 其特征在于， 所述反义寡核苷酸能够特异性结合LINC00624以抑制/ 降解其表达。 2.根据权利要求1所述的反义寡核苷酸， 其特征在于， 所述反义寡核苷酸选自由如下 (1)‑(3)任一项所组成的组： (1)如SEQ ID NO： 1‑5中任一条序列所示； (2)如SEQ ID NO： 1‑5所示序列中的至少2条； (3)能够和如(1)所示的序列在高严格性或非常高的严格性条件下杂交的序列的互补 序列编码的一种或多种核苷酸。 3.根据权利要求2所述的反义寡核苷酸， 其特征在于， 所述反义寡核苷酸具有至少一个 修饰； 所述修饰选自核苷间键修饰、 甲基化修饰或胆固醇修饰中的一种或多种； 优选的， 所 述核苷间键修饰为胆固醇修饰。 4.一种能够治疗癌症的药物组合物， 其特征在于， 所述药物组合物中活性成分为权利 要求1‑3任一所述的反义寡核苷酸， 所述癌症选自黑素瘤、 肉瘤、 淋巴瘤、 脑癌、 乳腺癌、 肝 癌、 胃癌、 肺癌、 结肠癌； 优选为乳腺癌。 5.根据权利要求4所述的药物 组合物， 其特征在于， 所述核苷酸存在于脂质体中或连接 到药学上可接受的载体上。 6.权利要求1 ‑3任一所述的反义寡核苷酸在制备具有以下任一所述功能的药物中的应 用， 其特征在于， 所述应用选自： (a)预防和/或治疗癌症； (b)抑制癌细胞的生长； (c)缓慢持续杀伤癌细胞； (d)癌症的免疫 治疗； 其中， 所述癌症选自黑素瘤、 肉瘤、 淋巴瘤、 脑癌、 乳腺癌、 肝癌、 胃癌、 肺癌、 结肠癌； 优 选为乳腺癌。 7.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述细胞选自增生性的、 瘤性的、 前癌性的 或转移性的细胞。 8.根据权利要求7所述的应用， 其特征在于， 所述转移性的细胞选自转移性的肿瘤细 胞。 9.一种缓慢持续杀伤细胞的方法， 用于非疾病 诊断和治疗目的， 其特征在于， 所述方法 包括将细胞与权利要求1 ‑3所述的反义寡核苷酸或权利要求 4‑5所述的药物组合物接触。 10.根据权利要求9所述的方法， 其特征在于， 所述细胞选自增生性的、 瘤性的、 前癌性 的或转移性的细胞； 所述 转移性的细胞选自转移性的肿瘤 细胞。 11.根据权利要求9所述的方法， 其特征在于， 所述药物组合物可以通过口服、 腹膜内、 静脉内、 动脉内、 肌肉内、 皮内、 皮下、 经皮、 鼻腔、 经直肠， 肿 瘤体内注射、 肿 瘤腔内留置、 神 经鞘内注射、 蛛网膜下腔注射或系统性施用； 可选的， 所述系统性施用包括通过血管内施 用； 优选的， 所述血 管内施用选自注射、 灌注。 12.根据权利要求9所述的方法， 其特征在于， 所述方法还包括施用第 二抗癌疗法， 所述 第二种抗癌疗法为化学疗法、 放射疗法、 免疫疗法、 生物疗法、 靶向疗法和手术疗法中一种 或多种的组合。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114196675 A 2靶向LINC0 0624的反义寡核 苷酸及其在乳腺癌治疗中的应用 技术领域 [0001]本发明属于乳腺癌治疗技术领域， 涉及靶 向LINC00624的反义寡核苷酸及其在乳 腺癌治疗中的应用。 背景技术 [0002]LINC00624是一个在肿瘤细胞中高表达的长链非编码RNA。 数据显示是一个新发现 的长链非编码RNA。 LINC00624可通过稳定ADAR1， 抑制细胞内RNA感知， 从而降低干扰素通路 的活化并促进乳 腺癌治疗耐药。 同时， LINC00624高表达可以降低免疫治疗的疗效。 ASO可作 为工具对L INC00624进行干扰， 具有转 化价值。 [0003]目前已在多种肿瘤中确定了大量发挥癌基因作用的Lnc RNA。 在乳腺癌中的相关研 究发现， 长链非编码基因HOTAIR的表达可促进雌激素受体(ER)的转录因子活性， 从而促进 他莫昔芬耐药。 小鼠中MaTAR  25(Mammary  Tumor‑Associated  RNA 25， 乳腺肿瘤相关RNA   25)的lncRNA可促进细胞迁移和侵袭。 敲除该基因可以明显抑制小鼠乳腺癌生长及转移， 该 LncRNA的人基因组同源产物LINC01271高表达与乳腺肿瘤的恶性进展直接相关。 因此 LncRNA具有作为乳腺癌风险基因、 诊断标志 物、 预后标志 物和治疗 靶点的价 值。 [0004]现有研究使用的敲低长链非编码RNA表达的工具包括： 小分子干扰核糖核酸 (small interferin g RNA,siRNA)或者短发卡RNA(short  hairpin RNA)， 其中具有较大临 床应用潜力的是小分子干扰核糖核酸(短发卡 RNA需要载体过表达到细胞中， 临床转化潜力 低)。 目前， 尚未有研 究报道针对LINC00624的小分子干扰核糖核酸在乳腺癌治疗领域中的 作用。 发明内容 [0005]基于现有技术存在的缺陷， 本发明发现了乳腺癌耐药的分子标志物和治疗靶点 LINC00624， 并获得能高效靶向 降解细胞中LINC00624的反义寡核苷酸， 从而实现单用或联 合用药， 增强抗癌效果的药物。 [0006]第一方面， 本发明提供了反义寡核苷酸， 所述反义寡核苷酸能够特异性结合 LINC00624以抑制/降解 其表达。 [0007]在某些实施例中， 所述反义寡核苷酸选自由如下(1) ‑(2)任一项所组成的组： [0008](1)如SEQ ID NO： 1‑5中任一条序列所示； [0009](2)如SEQ ID NO： 1‑5所示序列中的至少2条； [0010](3)能够和如(1)所示 的序列在高严格性或非常高的严格性条件下杂交的序列的 互补序列编码的一种或多种核苷酸。 [0011]在某些实施例中， 所述反义寡核苷酸具有至少一个修饰； 所述修饰选自核苷间键 修饰、 甲基化修饰或胆固醇修饰中的一种或多种； 优选的， 所述核苷间键修饰为胆固醇修 饰， 以便增强对癌细胞膜和细胞核膜的穿透性。 [0012]第二方面， 本发明提供了一种能够治疗癌症的药物组合物， 所述药物组合物种活说　明　书 1/9 页 3 CN 114196675 A 3