ICS 67.020 CCS X 04 山 14 西 省 地 方 标 准 DB 14/T 2378—2021 黄精多糖提取技术规程 2021 - 12 - 28 发布 2022 - 02 - 28 实施 山西省市场监督管理局  发 布 DB 14/T 2378—2021 目 次 前言....................................................................................................................................................................... II 1 范围................................................................................................................................................................... 1 2 规范性引用文件............................................................................................................................................... 1 3 术语和定义....................................................................................................................................................... 1 4 技术要求........................................................................................................................................................... 1 5 质量要求........................................................................................................................................................... 2 6 贮藏................................................................................................................................................................... 3 附录 A（规范性） 黄精多糖含量测定..............................................................................................................4 I DB 14/T 2378—2021 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由山西药品监督管理局提出并监督实施。 本文件由山西省药品质量管理标准化技术委员会归口。 本文件起草单位：山西省医药与生命科学研究院、山西省药品检查中心、太原市卫生学校、屯留县 农业技术推广中心。 本文件主要起草人：张璐、赵志君、杨莹莹、韩小平、任婧、李小进、李晓艳、董岳峰、张娇、赵 静宇、付蕾、牛金红。 II DB 14/T 2378—2021 黄精多糖提取技术规程 1 范围 本文件规定了黄精多糖提取的术语和定义、技术要求、质量要求、贮藏等内容。 本文件适用于工业生产中黄精多糖水提醇沉法的提取制备。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 5749 生活饮用水卫生标准 GB 31640 食品安全国家标准 食用酒精 GB/T 603 化学试剂 试验方法中所用制剂及制品的制备 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 《中华人民共和国药典》2020版 一部 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 黄精 为百合科植物滇黄精Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl.、黄精Polygonatum sibiricum Red. 或多花黄精Polygonatum cyrtonema Hua的干燥根茎。 多糖 多糖是一类由10 个以上的单糖通过糖苷键聚合而成的化合物，通常是由几百个甚至几千个单糖组 成的高分子化合物，能被水解成为多个单糖。 4 技术要求 原料要求 4.1.1 4.1.2 4.1.3 黄精应符合《中国药典》2020 版一部黄精饮片项下有关规定。 工业用水应符合 GB 5749 生活饮用水卫生要求。 95%酒精应符合 GB 31640 食用酒精要求。 提取工艺 1 DB 14/T 2378—2021 4.2.1 4.2.1.1 水提 浸泡 取一定量黄精，切成厚片，按照料液比1:15 加水浸泡黄精饮片至透芯。 4.2.1.2 一次提取 煎煮2 h，提取液滤过，取滤液待用。 4.2.1.3 二次提取 取4.2.1.2中药渣加15 倍量水，煎煮2 h，提取液滤过，取滤液待用。 4.2.1.4 合并提取液 合并4.2.1.2 和4.2.1.3 中滤液。 4.2.2 4.2.2.1 制备 浓缩 取4.2.1.4提取液减压浓缩，浓缩至相对密度1.15-1.20（80 ℃）的浓缩液。 4.2.2.2 醇沉 取 4.2.2.1 浓缩液置于醇沉罐中，搅拌加入 95%食用酒精至酒精浓度 80%，停止搅拌，4 ℃～10 ℃ 醇沉 12 h 以上。 4.2.2.3 离心 取 4.2.2.2 醇沉液，4500 rpm 离心 10 min，分离上清液，收集沉淀。 4.2.2.4 回收酒精 取4.2.2.3上清液减压回收酒精，至无醇味。 4.2.2.5 干燥 取 4.2.2.3 醇沉物真空微波干燥，加热温度 40 ℃，真空度低于-0.1 MPa，干燥至水分≤10.0%即得。 5 质量要求 黄精多糖质量要求见下表。 表1 2 黄精多糖质量要求 检测项目 标准 性状 棕色至棕褐色不规则块状或粉末状物，色泽均一，有黄精 固有的气味。 DB 14/T 2378—2021 水分 含量测定 6 不得过10.0%，测定方法按《中华人民共和国药典》2020 年版四部——通则0832：水分测定法（第二法）规定执行。 含黄精多糖不少于35.0%，测定方法见附录A。 贮藏 避光，密封，置阴凉处。 3 DB 14/T 2378—2021 A A 附 录 A （规范性） 黄精多糖含量测定 A.1 试剂 A.1.1 无水葡萄糖对照品（含量≥99.9%），来源于中国食品药品检定研究院。 A.1.2 乙醇（分析纯） A.1.3 浓硫酸（分析纯）。 A.1.4 蒽酮（分析纯） 。 A.1.5 0.2%蒽酮-硫酸溶液的制备：准确称取蒽酮0.2 g，置于100 mL容量瓶中，用5 mL乙醇溶解， 再用75%硫酸稀释至刻度，摇匀，即得。 A.2 对照品溶液的制备 取经105 ℃干燥至恒重的无水葡萄糖对照品33 mg，精密称定，置100mL量瓶中，加水溶解并稀释 至刻度，摇匀，即得每1 mL中含无水葡萄糖0.33 mg的对照品溶液。 A.3 样品溶液的制备 称取干燥的黄精多糖0.25 g，蒸馏水溶解，过滤沉淀，定容于100 mL容量瓶中。 A.4 标准曲线的制备 精密量取对照品溶液0. 1mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL、0.5 mL、0.6 mL，分别置10mL具塞刻度试 管中，各加水至2.0 mL，摇匀，在冰水浴中缓缓滴加0.2%蒽酮-硫酸溶液至刻度，混匀，放冷后置水浴 中保温10 min，取出，立即置冰水浴中冷却10 min，取出，以相应试剂为空白。照紫外-可见分光光度法 （中国药典2020版四部通则0401），在582 nm波长处测定吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标， 绘制标准曲线。 A.5 样品测定 精密量取样品溶液1.0 mL，置于10 mL具塞刻度试管中，加水至2.0 mL，按A.4 中标准曲线制备方 法操作后测定，采用标准曲线法计算样品溶液中多糖的浓度C（mg/mL）。 A.6 提取物黄精多糖含量计算 提取物中黄精多糖的含量，按式（1）计算： 黄精多糖（%）= C V  100 % …………………………………………………………… （1） m  103 式中： C——样品浓度，单位为毫克每毫升，（mg/mL） V——样品稀释倍数，单位为毫升，（mL） m——黄精多糖提取物取样量，单位为克，（g） A.7 4 允许误差 DB 14/T 2378—2021 同一操作者平行两次测试结果允许：相对相差≤5.0%。 5